谭艳平,杨玖英,朱英国,刘学群,王春台.琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法[J].中南民族大学学报自然科学版,2004,(1):10-14
琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法
New and Simple Method for Recovery of Trace DNA Fragments from Normal Agarose Gel
  修订日期:2004-01-15
DOI:10.12130/znmdzk.20040106
中文关键词: 琼脂糖凝胶电泳  DNA片段 回收  正交实验法  聚合酶链式反应
英文关键词: agarose gel electrophoresis,DNA recovery,orthogonal design,PCR
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划),湖北省科技攻关项目
作者:谭艳平  杨玖英  朱英国  刘学群  王春台
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中文摘要:
      对现有的DNA片段回收方法进行了改进.琼脂糖凝胶中目的DNA片段条带切割后,浸入适量的TE溶液(0.2~0.4 mL/g 琼脂糖胶),在37 ℃水浴保温15 min,以溶出凝胶中的DNA,利用相应的引物对浸出的微量DNA样品进行与原PCR反应相同条件下的PCR扩增,直接用75 %乙醇沉淀后,适量TE溶解得到回收的目的DNA样品.此法回收的DNA片段可用于分子克隆,特别是适用于TA载体的克隆与测序,适合大批量微量样品的准确回收,防止了因试剂盒回收造成的微量DNA片段的丢失.
英文摘要:
      
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