沈金花,周 婉.MTMR14稳定敲减细胞株的建立及表型分析[J].中南民族大学学报自然科学版,2018,(4):22-26
MTMR14稳定敲减细胞株的建立及表型分析
Establishment of MTMr14 Stable Knockdown Cell Line and Phenotype Analysis
  
DOI:10.12130/znmdzk.20180405
中文关键词: CRISPR /Cas9  MTMR14  细胞增殖
英文关键词: CrISPr/Cas9  MTMR14  cell proliferation
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31371366) ; 上海市教委科研创新项目(14ZZ075)
作者单位
沈金花,周 婉 中南民族大学 生命科学学院医学生物研究所&武陵山区特色资源植物种质保护与利用 湖北省重点实验室武汉 430074 
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中文摘要:
      目的: 为了解析芽殖酵母 Num1 蛋白在纺锤体定位和线粒体中的调节机制.方法: 利用大肠杆菌原核表达 并纯化了在 Num1 功能中起核心作用的补丁组装(PA) 结构域的重组蛋白, 通过蛋白体外结合实验(Pull-down) 分 离了酵母细胞中与 PA 结构域相结合的蛋白复合物,并对其进行了质谱分析.结果: 鉴定了一系列新的 Num1 互作蛋 白,包括核糖体蛋白,参与蛋白折叠、分配及转运的内质网和高尔基复合体蛋白, 参与基因转录和翻译的核酸酶和 蛋白酶,及其他功能的蛋白.结论: Num1 的互作蛋白的鉴定为进一步研究 Num1 的作用机制奠定了基础.
英文摘要:
      Objective: To study the function of MTMR14 gene in lung cancer cells.Method: CRISPR/Cas9 gene editing technique was used to obtain a gene knockdown human embryonic kidney cell line (293T) and this pair of edited sgRNAs was selected to act on adenocarcinoma human alveolar basal epithelium cells (A549) to get a gene knockdown A549 cell line, followed by a series of phenotypic analysis of wild-type and the knockdown cells. Results: In the absence of synchronization, there was no significant change in the wild-type and knockdown cell cycle. However, the mRNA expression levels of CyclinD1 and CyclinE in the knockdown cells significantly increased, while the mRNA expression levels of P21 and P27 significantly decreased. Conclusion: The decrease of MTMR14 gene expression can promote cell proliferation
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