夏珍珍 姚家成 黄粤 冯喆 赵新颖 李晓华.中间苍白杆菌SCUEC4菌株中尼古丁 降解相关ocnC基因的克隆与表达[J].中南民族大学学报自然科学版,2020,39(1):18-23
中间苍白杆菌SCUEC4菌株中尼古丁 降解相关ocnC基因的克隆与表达
Cloning and expression of ocnC gene involved in nicotine degradation in Ochrobactrum intermedium SCUEC4
  
DOI:10.12130/znmdzk.20200104
中文关键词: 中间苍白杆菌SCUEC4菌株  尼古丁降解  ocnC基因  克隆与表达
英文关键词: Ochrobactrum intermedium SCUEC4  nicotine degradation  ocnC gene  cloning and expression
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31070087);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(CZY19018)
作者单位
夏珍珍 姚家成 黄粤 冯喆 赵新颖 李晓华 中南民族大学 生命科学学院 微生物资源与利用湖北省工程技术研究中心/生物技术国家民委重点实验室武汉 430074 
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中文摘要:
      对中间苍白杆菌SCUEC4菌株中与尼古丁降解相关的ocnC基因进行克隆和表达,并对OcnC蛋白的表达条件进行优化,通过PCR扩增获得ocnC基因,构建重组质粒pET28a(+)-ocnC,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,采用不同的IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对OcnC蛋白进行诱导表达.结果表明:ocnC基因大小为1344 bp,编码蛋白分子量为48.0 kDa,重组表达菌株在IPTG浓度为1.0 mmol?L-1、诱导温度在37 ℃及诱导表达时间在20 h的优化表达条件时,OcnC蛋白的表达量较高.
英文摘要:
      The study aimed to clone and express the ocnC gene involved in nicotine degradation in Ochrobactrum intermedium SCUEC4 and optimize the conditions of the expression of the OcnC protein. Methods: The ocnC gene was amplified with PCR, and the recombinant plasmid pET28a(+)-ocnC was constructed and transformed into Escherichia coli BL21(DE3) for heterologous expression, and the effect of IPTG concentration, induction temperature and time on the expression of OcnC protein was studied. Results: The size of ocnC gene was 1344 bp, encoding a 48.0 kDa protein. Under the optimized expression conditions of IPTG concentration of 1.0 mmol?L-1, induction temperature at 37 ℃ and induction expression time of 20 h, the expression of OcnC protein was relatively high.
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