宋发军,吕昕芮,刘祖懿,杨瑞霜,王红莹,孟艳艳.七叶一枝花中两个尿苷二磷酸糖基转移酶基因的克隆和原核表达[J].中南民族大学学报自然科学版,2022,41(3):277-284
七叶一枝花中两个尿苷二磷酸糖基转移酶基因的克隆和原核表达
Cloning and prokaryotic expression of two uridine diphosphate glycosyltransferase genes in Paris polyphylla var. chinensis
  
DOI:10.12130/znmdzk.20220304
中文关键词: 七叶一枝花  尿苷二磷酸糖基转移酶  原核表达  体外酶促反应
英文关键词: Paris polyphylla var. chinensis  UDP-glycosyltransferase  procaryotic expression   in vitro enzymatic reaction
基金项目:中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(CZY20003)
作者单位
宋发军 中南民族大学 生命科学学院 & 生物技术国家民委重点实验室 & 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室武汉 430074 
吕昕芮 中南民族大学 生命科学学院 & 生物技术国家民委重点实验室 & 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室武汉 430074 
刘祖懿 中南民族大学 生命科学学院 & 生物技术国家民委重点实验室 & 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室武汉 430074 
杨瑞霜 中南民族大学 生命科学学院 & 生物技术国家民委重点实验室 & 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室武汉 430074 
王红莹 中南民族大学 生命科学学院 & 生物技术国家民委重点实验室 & 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室武汉 430074 
孟艳艳 中南民族大学 生命科学学院 & 生物技术国家民委重点实验室 & 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室武汉 430074 
摘要点击次数: 255
全文下载次数: 356
中文摘要:
      尿苷二磷酸糖基转移酶(uridine diphosphate glycosyltransferases,UGTs)是重楼皂苷生物合成途径下游的关键酶,通过催化薯蓣皂苷元或偏诺皂苷元的糖基化反应以形成多种重楼皂苷. 因此,获取并表征与重楼皂苷合成相关的UGTs,对于解析重楼皂苷的生物合成途径具有重要的研究价值. 为此,在获得2个UGTs基因(PpUGT01PpUGT42)全长的基础上,分别构建了它们的原核表达载体,并将其在大肠杆菌中顺利表达,同时获得了可溶性蛋白表达产物. 此外,还进一步利用体外酶促反应对PpUGT42的催化活性进行了分析. 结果为获得催化重楼皂苷生成的关键UGTs奠定了基础,也可为人工合成重楼皂苷提供新的线索.
英文摘要:
      Uridine diphosphate glycosyltransferases (UGTs) were the key enzymes downstream of the biosynthetic pathway of polyphyllions, which catalyzed the glycosylation reaction of diosgenin or pennogenin to form a variety of polyphyllions. Therefore, the acquisition and characterization of UGTs related to the polyphyllions biosynthesis was important for analyzing the biosynthetic pathways of polyphyllions. In this study, on the basis of obtaining the full length of two UGTs genes (PpUGT01 and PpUGT42), the prokaryotic expression vectors of two genes were constructed respectively, which were successfully expressed in E. coli, and the soluble protein expression products were obtained. In addition, the catalytic activity of PpUGT42 was further analyzed by in vitro enzymatic reaction. The results laid a foundation for obtaining the key UGTs for catalyzing the formation of polyphyllions, and also provided a new clue for the artificial synthesis of polyphyllions.
查看全文   查看/发表评论  下载PDF阅读器
关闭